1. 熒光信號異常(過高或過低)
原因:
檢測管未完全避光,導(dǎo)致熒光淬滅或背景信號干擾。
樣本或試劑中存在雜質(zhì)(如蛋白質(zhì)、鹽類),影響熒光結(jié)合效率。
檢測管材質(zhì)不匹配(如非官方推薦品牌),熒光透過率低。
解決方案:
確保檢測管存儲于避光環(huán)境,操作時避免強(qiáng)光直射。
離心樣本去除雜質(zhì),或使用高純度試劑。
優(yōu)先選擇官方認(rèn)證的Qubit檢測管(如Thermo Fisher Scientific或翌圣生物產(chǎn)品)。
2. 背景值過高
原因:
檢測管未清潔干凈,殘留熒光物質(zhì)。
試劑或樣本污染(如重復(fù)使用檢測管)。
儀器未校準(zhǔn)或存在光學(xué)污染。
解決方案:
使用前用70%乙醇擦拭檢測管,避免重復(fù)使用。
定期校準(zhǔn)Qubit儀器,清理檢測槽。
若背景值持續(xù)異常,聯(lián)系技術(shù)支持排查儀器故障。
3. 檢測結(jié)果重復(fù)性差
原因:
檢測管加樣體積不準(zhǔn)確(如移液器誤差)。
樣本或試劑未充分混勻,導(dǎo)致濃度梯度。
檢測管壁吸附樣本,影響實際檢測量。
解決方案:
使用校準(zhǔn)后的移液器,確保加樣體積一致。
樣本與試劑混合后渦旋震蕩3-5秒,靜置后離心去除氣泡。
選擇低吸附性的檢測管(如翌圣生物Qubit專用檢測管,CV值<10%)。
4. 檢測管破裂或漏液
原因:
操作不當(dāng)(如過度擠壓或跌落)。
檢測管質(zhì)量缺陷(如管壁過薄)。
低溫環(huán)境下檢測管變脆。
解決方案:
輕拿輕放檢測管,避免劇烈震蕩。
選擇質(zhì)量可靠的檢測管品牌,檢查包裝是否完好。
若需低溫保存,提前將檢測管恢復(fù)至室溫再使用。
5. 檢測管與儀器不兼容
原因:
使用了非官方推薦的檢測管型號。
檢測管尺寸或材質(zhì)不符合儀器要求(如厚度、透光率)。
解決方案:
參考Qubit儀器說明書,選擇適配的檢測管(如0.2 mL或0.5 mL規(guī)格)。
避免使用非透明或高自發(fā)熒光的檢測管。
若需批量檢測,優(yōu)先選擇兼容酶標(biāo)儀的檢測管(如翌圣生物離心管開蓋器搭配使用)。
6. 檢測管內(nèi)樣本凝固或結(jié)晶
原因:
樣本保存溫度不當(dāng)(如DMSO試劑需室溫保存)。
檢測管內(nèi)樣本長時間暴露于低溫環(huán)境。
解決方案:
嚴(yán)格按照試劑說明書保存樣本和試劑。
檢測前將樣本恢復(fù)至室溫,避免反復(fù)凍融。
總結(jié)建議
定期校準(zhǔn):確保Qubit儀器和檢測管處于最佳狀態(tài)。
優(yōu)化操作:遵循標(biāo)準(zhǔn)流程,減少人為誤差。
選擇優(yōu)質(zhì)耗材:使用官方認(rèn)證或高兼容性的檢測管(如翌圣生物Qubit專用檢測管,R²>0.99)。
通過以上措施,可顯著提高Qubit檢測的準(zhǔn)確性和重復(fù)性。